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患有短期健忘症的多莉(艾倫·德傑尼勒斯 Ellen DeGeneres 配音)曾經也擁有美好的家庭,然而一連串的意外讓她與和藹可親的父母失散。此去經年,多莉邂逅了小丑魚父子馬林(艾伯特·布魯克斯 Albert Brooks 配音)和尼莫(海登·羅蘭斯 Hayden Rolence 配音),與他們經歷了前所未有的大冒險。平靜的日子裡,童年時期的片段記憶突然闖入多莉的腦海,於是她再度踏上尋找父母的旅程。這一次,她來到了海洋生物博物館,遇到了不打算回到大海的章魚漢克(艾德·奧尼爾 Ed O'Neill 配音)以及童年時的朋友鯨鯊運兒(凱特琳·奧爾森 Kaitlin Olson 配音)。循著記憶中的蛛絲馬跡,她離父母越來越近。然而在這一過程中,她又和馬林父子失散了。